ExpressArt® FFPE RNAready Quick kit (AmpTec)

Kolonkový kit určený pro přístroj Fujifilm QuickGene Mini 80 i pro QG-810. Kromě přístrojů k izolaci můžete pro přípravu vzorků využít naší speciální ceny Thermomixeru Comfort, který máme také v nabídce.

Vlastnosti

  • kit je optimalizovaný pro izolaci celkové RNA z archiválií, z tkání fixovaných formaldehydem nebo paraformaldehydem, či zalitých do parafínu
  • poskytuje vysoce kvalitní FFPE RNA (formaldehyde or paraformaldehyde-fixed, paraffin-embedded)
  • je vhodný pro izolaci RNA z velkého nebo naopak velmi malého množství tkání:
    • velký vzorek: až 5 řezů současně (10 až 20 µm tlustých), nebo až 30 mg nenařezaného vzorku, na jednu reakci
      Výtěžek je ~ 2 µg RNA na řez (10 µm tlustý a 1 cm2 velký).
    • malý vzorek: např. z laserové mikrodisekce FFPE vzorku
      Výtěžek je ~ 2 až 7 pg na buňku (ze 100 buněk ~ 0,2 až 0,7 ng RNA).
  • výsledná RNA je již koncentrovaná a je ji možno ihned požít do dalších pokusů (není nutné její přesrážení), je vhodná pro qRT-PCR, amplifikaci mRNA i microarray analýzu
  • postup nevyžaduje lyzační krok přes noc - deparafinace v dopoledních hodinách a provedení qRT-PCR odpoledne

Princip FFPE Quick RNAready kitu

  • využívá speciální lyzační a inkubační podmínky pro co nejvyšší výtěžky RNA a co nejlepší kvalitu RNA (templátu)
  • deparafinace vzorku tkáně je následována homogenizací a lyzí proteinázou K a detergenty
  • lyzační pufr je doplněn o analog nukleových kyselin NucleoGuard, který je univerzálním inhibitorem RNáz (a vytlačuje pevně vázanou RNA z agregátů o vysoké molekulární hmotnosti, což vede k účinnému uvolnění RNA a zachování kvality RNA)
  • kit nabízí (zahrnuje) patentovaný demodifikační krok (je patentován) k odstranění kroslinků způsobených formalínem. RNA lze ihned po izolaci použít jako templát pro reverzní transkripci apod.
  • nukleové kyseliny jsou navázány na kolonku, kontaminace (soli, proteiny a další tkáňové zbytky) jsou následně odmyty, DNA je rozložena DNázou I a fragmenty DNA včetně DNázy jsou odstraněny sérií oplachů, čistá RNA je eluována z kolonky pufrem s nízkou koncentrací solí nebo vodou
  • pokud je RNA izolována pomocí přístroje FUJIFILM QuickGene-Mini80, není potřeba žádná centrifugace

Související odkazy

Ceník
Katalogové číslo Popis Cena bez DPH
9010-A96 ExpressArt FFPE Quick RNAready kit na dotaz

Pracovní postup

RNA izolace ze FFPE vzorků pomocí ExpressArt FFPE Quick RNAready kitu

Pracovní postup